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BHQ黑洞淬灭剂+全波段荧光染料,多重qPCR的左膀右臂

版权所有,转载请联系基因市场部
2018-11-28

光污染,又称光害,是人类过度使用照明系统而产生的问题。最显而易见的影响是城市里夜空的星星被众多大厦的灯光所覆盖而消失了。这使得观察宇宙的研究受到影响,而且亦破坏了生态平衡。             ---《维基百科》

 

 

  其实,除了日常生活,在qPCR试验中也存在光污染问题!

qPCR,又称荧光定量PCR,通过在特异的探针两端分别标记荧光基团和淬灭基团,再依靠淬灭基团对荧光基团的作用--淬灭或释放荧光基团--来达到对DNA或RNA进行准确定量的目的。

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如果将细胞比喻成漫无边际的黑夜,探针无疑就是黑夜中的启明灯,报告基团是灯泡,特异性的序列是向导,指引靶向基因的位置,而淬灭基团就是这盏灯的开关,决定灯什么时候关闭,什么时候点亮。

 

对目标物准确的指引与定量,除了向导(序列)的特异性,还决定于开关的好坏(淬灭基团的淬灭效率 ),优质的开关,关闭的时候所有灯都会熄灭,而不够灵敏的开关,关闭的时候不能将所有灯光熄灭,这样残留的灯光就会对目标物的寻找造成干扰,导致假阳性或假阴性的产生。

 

所以,有时候,当你用qPCR检测不到目标基因的表达或结果不准确时,也许并不是探针或引物的特异性出现了问题,也不是酶出现了问题,仅仅是因为选择的荧光淬灭基团不理想,淬灭效果不好,荧光污染导致真正的荧光信号被掩盖或削弱了

 

BHQ---真正的黑洞淬灭剂,Biosearch专利技术,qPCR及SNP分型的福音

为了解决qPCR实验体系中光污染的问题,最大化提高荧光信号的信噪比,基因有限公司代理的 Biosearch Technologies研发了一款专利的荧光淬灭剂---Black Hole Quencher®(BHQ)淬灭剂,该淬灭剂就像一个黑洞,能够将一定距离内荧光基团发出的光全部吸收,真正实现对荧光信号的100%淬灭。且吸收光谱范围广,从430nm到近红外光,可搭配使用的荧光基团种类多,特别适合用在多重荧光定量PCR中,目前BHQ淬灭试剂已成为高效荧光探针设计与合成的工业生产标准。

 

https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/LKU1F0MmURogZSuCju72ibCDtvvquJScflVSaQZng0oSgMWa3kIu5gppErH9lfeCMBMPfxib7BVBpPjt6pYIP3Qg/640?wx_fmt=png

BHQ 430nm到730nm近红外光区前所未有的荧光淬灭光谱

 

针对近年来肆虐的寨卡、登革热、基孔肯雅以及西尼罗河病毒,美国FDA20178月推出了一个通吃的检测试剂盒:CII-ArboViroPlex rRT-PCR assay[PX1] 

 

尽管名字看起来十分复杂,但它的本质就是一个多重荧光定量PCR试剂盒而已。其高端之处在于:它的检测重数高达5重,能实现5色荧光定量PCR检测!

常规的实验室里,做2PCR检测时就已经面临了串色的问题,更不用说5重。

这个试剂盒如何做到5重检测而不串色?

仔细研究发现,它在荧光选择上下足了功夫:

① CAL Fluor Red 610 for ZIKV

② CAL Fluor Orange 560 for DENV

③ FAM for CHIKV

④ Quasar 670 for WNV

⑤ Quasar 705 for RNase P

其中CAL Fluor Red 610 CAL Fluor Orange 560Quasar 670Quasar 705都是LGC Biosearch公司的专利染料。他们的发射光峰差距大,可以显著的降低彼此间的干扰,从而从最根本保证了5重检测的可能性。

 

CAL Fluor®和Quasar®荧光染料的发射光谱跨越可见光和近红外光谱,是多重实时qPCR的理想选择。


实际上,Biosearch公司的荧光染料还远不止这些,真正做到了全波段覆盖!

 

 

Q1

细心的你可能会问:5种荧光染料聚在一起,背景信号会不会特别的恐怖?

                                                                                                                                                ——用BHQ啊!https://res.wx.qq.com/mpres/htmledition/images/icon/common/emotion_panel/smiley/smiley_79.png

 

除了高效率的荧光淬灭染料和多种样式的专利荧光染料, Biosearch Technologies还提供在线探针设计工具https://www.biosearchtech.com/support/tools/design-software/realtimedesign-software荧光基团光谱选择工具http://qpcrdesign.com/spectral-overlay),完全不用担心多重荧光定量PCR引物和探针设计麻烦,真正做到省心、省钱、省时间!

 

荧光基团光谱选择工具在线界面:

 

https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/LKU1F0MmURogZSuCju72ibCDtvvquJScfrDxsP04dqQDEvQiapRxWdGNZ4NhofSyXfXhthlfW4NuevGgANSicxJEw/640?wx_fmt=png

 

 

Biosearch Technologies----荧光引物/探针设计与合成的全球领导者

 

Biosearch Technologies是专业性荧光定量PCR探针合成及标记服务公司,提供与世界上各种荧光定量PCR仪配套的探针标记方式及荧光素。

 

创始人Ron Cook及诺贝尔得主Kary Mullis(PCR发明者)共同发明了Biosearch SAM I寡核苷酸合成器,合成了世界上首个PCR引物。 自Real-time PCR于上世纪90年代出现后,Biosearch的科学家们先后研发了被业界视为标准的Black Hole Quencher®(BHQ)黑洞淬灭剂及专利的CALFluor®和Quasar® 系列染料。

 

Biosearch拥有丰富的高品质产品线,不仅包括探针和引物产品,广泛应用于药物研发,基因组测序/SNP检测/基因表达分析等领域,也为其他寡核苷酸生产厂商提供核酸合成原材料。包括多种荧光染料和淬灭染料BHQ、具有高表面积电位的CPG支持载体和合成柱、用于寡核苷酸合成和色谱应用的化学活化的多孔玻璃,以及合成及纯化配件等。



基因有限公司为 Biosearch Technologies授权一级代理,想进一步了解更详细的产品信息,敬请留言或直接联系基因有限公司~


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